La pièce se déroule à Nymphée, dans le royaume du Bosphore. Mithridate, le roi du Pont, est un ennemi farouche de Rome. Alors qu'une fausse nouvelle annonce sa mort, ses deux fils, Xipharès et Pharnace, se retrouvent dans la même ville. Tous deux sont amoureux de Monime, une princesse grecque que leur père avait accordée et fait venir pour l'épouser. Xipharès, fidèle à son père et haïssant Rome comme lui, aime Monime en secret depuis longtemps. Pharnace, quant à lui, est secrètement allié aux Romains et convoite ouvertement Monime. Le retour inattendu de Mithridate bouleverse la situation. Découvrant les sentiments de ses fils par ruse et jalousie, il projette de se venger tout en préparant un ultime et grandiose projet : envahir l'Italie par le nord pour porter la guerre au cœur de Rome. La révélation de ce projet et la jalousie du roi précipiteront le drame, menant à une rébellion fomentée par Pharnace et à une fin tragique où l'honneur, l'amour et la mort s'entremêlent.
À Nymphée, Xipharès confie à Arbate, le gouverneur, sa douleur : la nouvelle de la mort de son père Mithridate est arrivée. Il se confie également sur son amour secret pour Monime, un amour bien antérieur à celui de son père. Pharnace, son demi-frère, est également amoureux d'elle et, contrairement à Xipharès, il est favorable aux Romains. Monime, désemparée, supplie Xipharès de la protéger des avances brutales de Pharnace. Xipharès lui avoue alors son amour, mais lui promet de respecter sa liberté. Survient alors Pharnace, qui presse Monime de l'épouser et de partir avec lui. Monime le repousse avec horreur, invoquant sa fidélité à Mithridate et son refus de s'allier à un ami des Romains. La dispute entre les deux frères est interrompue par Phoedime, qui annonce l'arrivée imminente de Mithridate, bien vivant. Les deux princes sont consternés.
"Je l'aime, et ne veux plus m'en taire, Puisqu'enfin pour rival je n'ai plus que mon frère."
"Seigneur, je viens à vous. Car enfin aujourd'hui Si vous m'abandonnez, quel sera mon appui ?"
Mithridate est de retour. Il apprend d'Arbate que Pharnace a courtisé Monime, mais que Xipharès n'a montré que de la loyauté. Soulagé que son fils préféré ne l'ait pas trahi, il s'entretient avec Monime. Percevant sa froideur et ses réticences à l'épouser, sa jalousie s'éveille. Il lui déclare qu'il sait qu'un de ses fils l'aime. Pour la confondre, il fait venir Xipharès et, devant elle, le charge de défendre ses intérêts auprès d'elle et de la convaincre. Restés seuls, Monime, déchirée, avoue à Xipharès qu'elle partage son amour, mais que son devoir la force à l'épouser, Mithridate. Elle le supplie de fuir sa présence pour lui épargner la souffrance. Xipharès est anéanti par cet amour partagé mais impossible.
"Ah Madame ! est-ce là de quoi me satisfaire ? Faut-il que désormais renonçant à vous plaire Je ne prétende plus qu'à vous tyranniser ?"
"Oui, Prince, il n'est plus temps de le dissimuler. Ma douleur pour se taire a trop de violence. ... Je ne suis point à vous, je suis à votre père."
Mithridate réunit ses deux fils pour leur dévoiler son projet grandiose : au lieu de fuir, il va envahir l'Italie par le nord, en contournant les défenses romaines, pour porter la guerre au cœur de l'empire. Il ordonne à Pharnace de partir épouser la fille du roi Parthe pour sceller une alliance. Pharnace, pris au piège, ose critiquer le projet, dévoilant ainsi sa tiédeur et sa préférence pour une paix avec Rome. Xipharès, au contraire, se porte avec enthousiasme volontaire pour mener cette guerre. Mithridate, furieux de la résistance de Pharnace, le fait arrêter. Pour se venger, Pharnace révèle alors que Xipharès aussi aime Monime et en est aimé. Resté seul, Mithridate, en proie au doute, décide de tendre un piège à Monime pour connaître la vérité. Il feint de renoncer à elle et propose de l'unir à Xipharès.
"C'est à Rome, mes fils, que je prétends marcher. ... Annibal l'a prédit, croyons-en ce grand homme, Jamais on ne vaincra les Romains que dans Rome."
"Mais Xipharès, Seigneur, ne vous a pas tout dit. C'est le moindre secret qu'il pouvait vous apprendre. ... Il aime aussi la reine, et même en est aimé."
Monime, inquiète de ne pas voir Xipharès, se rassure avec Phoedime. Xipharès arrive enfin, l'avertissant que Mithridate sait tout et qu'elle doit feindre pour sauver sa vie. Monime, se croyant trahie par un ennemi inconnu, réalise avec horreur que c'est elle-même qui a tout avoué au roi, tombée dans son piège. Elle supplie Xipharès de fuir. Mithridate survient et ordonne à Monime de l'épouser immédiatement. Face à son refus obstiné et à ses aveux, il entre dans une rage folle, hésitant entre punir Xipharès et se réconcilier avec lui. Dans son monologue, il balance entre la soif de vengeance et la raison d'État. Arbate interrompt ses réflexions pour lui annoncer la mutinerie de l'armée, menée par Pharnace qui a promis la paix avec Rome. La situation est critique.
"Non, Seigneur, vainement vous croyez m'étonner. Je vous connais. ... Perdez une rebelle. Armez-vous du pouvoir qu'on vous donna sur elle."
"Qui suis-je ? Est-ce Monime ? Et suis-je Mithridate ? Non, non, plus de pardon, plus d'amour pour l'ingrate."
Monime tente de se suicider avec son diadème, mais Phoedime l'en empêche. Apprenant la mort supposée de Xipharès, elle veut mourir. Arcas apporte du poison de la part du roi. Monime l'accepte avec joie, comme une délivrance. Au moment de boire, Arbate l'arrête. Il lui annonce que Xipharès est vivant et que Mithridate est mourant. Il raconte comment le roi, voyant tout perdu et cerné par les rebelles et les Romains, a tenté de s'empoisonner sans succès, puis s'est jeté dans la mêlée pour trouver une mort glorieuse. Blessé, il a été sauvé in extremis par l'arrivée de Xipharès, qui a vaincu les rebelles. Mithridate, mourant, est porté sur scène. Il bénit l'union de Xipharès et Monime, leur donnant sa bénédiction et leur ordonnant de fuir pour survivre et, un jour, le venger. Il expire dans les bras de son fils.
"Donnez. Dites, Arcas, au roi qui me l'envoie, Que de tous les présents que m'a fait sa bonté Je reçois le plus cher et le plus souhaité."
"J'expire environné d'ennemis, que j'immole. Dans leur sang odieux j'ai pu tremper mes mains, Et mes derniers regards ont vu fuir les Romains."
"Dans cet embrassement dont la douceur me flatte, Venez, et recevez l'âme de Mithridate."
Roi de Pont et de nombreux autres royaumes. C'est un guerrier vieillissant mais d'une énergie et d'un courage hors du commun, ennemi juré de Rome depuis quarante ans. Il est aussi un homme passionné, d'une jalousie féroce, capable de grandes ruses comme de terribles cruautés. Il aime Monime avec une passion possessive et ne supporte pas l'idée d'être trahi par ses fils.
PrincipalPrincesse grecque accordée à Mithridate, déjà déclarée reine. Vertueuse et fidèle à sa parole, elle est éprise de Xipharès depuis longtemps, mais son devoir et son honneur la poussent à résister à cet amour. Elle fait preuve d'un grand courage face à la jalousie et à la colère de Mithridate.
PrincipalFils de Mithridate, mais d'une mère différente de Pharnace. Loyal, courageux et dévoué à son père, il hait les Romains autant que lui. Il est secrètement amoureux de Monime depuis bien avant que son père ne s'y intéresse, ce qui le place dans un conflit tragique entre son amour et son devoir filial.
PrincipalFils de Mithridate. Il est décrit comme impétueux, présomptueux et perfide. Contrairement à son père et à son frère, il admire secrètement Rome et cherche son alliance. Il convoite ouvertement Monime et n'hésite pas à trahir son père pour satisfaire ses ambitions et ses désirs.
PrincipalConfident de Mithridate et gouverneur de la place de Nymphée. Il est loyal au roi mais respecte et admire aussi Xipharès. Il sert de messager et d'intermédiaire, et tente de protéger Monime à la fin.
MinorConfidente de Monime. Elle est attentive et dévouée à sa maîtresse, cherchant à la conseiller et à la réconforter dans ses épreuves.
MinorDomestique de Mithridate. Il apparaît pour annoncer des nouvelles importantes, notamment l'arrivée des Romains et pour apporter le poison à Monime sur ordre du roi.
Minor