Jupiter, amoureux de la mortelle Alcmène, épouse d'Amphitryon, prend l'apparence de ce dernier pour la séduire en son absence. Mercure, quant à lui, se fait passer pour Sosie, le valet d'Amphitryon. Le retour inattendu du véritable Amphitryon et de son valet crée une confusion générale, des quiproquos et une crise conjugale qui questionnent l'identité, la fidélité et la nature des apparences.
Mercure convainc la Nuit de prolonger les heures d'obscurité pour permettre à Jupiter, déguisé en Amphitryon, de séduire Alcmène. Le vrai Sosie, envoyé en messager, est empêché d'entrer chez lui par Mercure qui a pris son apparence et le bat. Jupiter, sous les traits d'Amphitryon, quitte Alcmène à l'aube, non sans avoir semé le trouble en lui demandant de distinguer l'amant de l'époux.
"Le véritable Amphitryon est l'Amphitryon où l’on dîne."
Le véritable Amphitryon revient et est abasourdi par les récits de Sosie concernant son double. Il confronte Alcmène, qui lui affirme l'avoir déjà vu et reçu la veille, preuve à l'appui (un nœud de diamants). La scène tourne à la querelle conjugale. Jupiter, réapparaissant sous les traits d'Amphitryon, parvient à se réconcilier avec Alcmène par un discours passionné, tandis que le vrai Amphitryon, fou de rage et de jalousie, cherche des alliés.
"Ah ! quel étrange coup m’a-t-il porté dans l’âme ! En quel trouble cruel jette-t-il mon esprit !"
La confusion atteint son comble lorsque les deux Amphitryon se font face devant des témoins. Mercure, puis Jupiter lui-même, se révèlent sous leur forme divine. Jupiter explique qu'il est l'auteur de la supercherie et apaise la colère d'Amphitryon en annonçant que de cette union naîtra Hercule, un héros dont la gloire rejaillira sur lui. La pièce se conclut sur l'idée qu'être le rival de Jupiter est un honneur.
"Un partage avec Jupiter n’a rien du tout qui déshonore ; Et sans doute il ne peut être que glorieux de se voir le rival du souverain des Dieux."
Le roi des dieux. Amoureux d'Alcmène, il use de son pouvoir pour prendre l'apparence de son mari, Amphitryon. Il incarne à la fois la toute-puissance capricieuse et les tourments d'un amant passionné.
PrincipalGénéral des Thébains, époux d'Alcmène. Héros victorieux, il est d'abord fier de ses exploits avant d'être plongé dans le doute, la jalousie et l'humiliation par la supercherie divine.
PrincipalFemme d'Amphitryon. Elle est vertueuse, amoureuse de son mari, mais se trouve involontairement au cœur d'une tromperie cosmique. Son honneur et sa perception de la réalité sont mis à rude épreuve.
PrincipalValet d'Amphitryon. Poltron, loquace et philosophe à sa manière, il est le premier à affronter son double (Mercure). Son rôle comique met en lumière les questions d'identité de façon burlesque.
PrincipalLe messager des dieux, fils de Jupiter. Il prend l'apparence de Sosie. Espiègle et moqueur, il est l'agent actif de la supercherie et aime à tourmenter son homologue mortel.
PrincipalSuivante d'Alcmène et femme de Sosie. Elle se plaint du manque d'ardeur de son mari et sert de contrepoint réaliste et querelleur aux tourments plus nobles d'Alcmène.
SecondairePersonnification divine de la nuit. Elle est initialement réticente à aider Jupiter dans son stratagème amoureux, mais finit par accepter, poussée par Mercure.
SecondaireCapitaines thébains, compagnons d'armes d'Amphitryon. Ils sont témoins de la confusion finale et tentent de raisonner leur général.
Mineur